ดำเนินการศึกษาประเมินผลกระทบสิ่งแวดล้อม (EIA) เพื่อศึกษาว่าการพัฒนาโครงการจะก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงต่อสภาพทรัพยากรสิ่งแวดล้อมในพื้นที่โครงการอย่างไร และกำหนดมาตรการป้องกัน แก้ไข และลดผลกระทบสิ่งแวดล้อม และมาตรการติดตามตรวจสอบผลกระทบสิ่งแวดล้อม เพื่อให้การพัฒนาโครงการมีผลกระทบต่อสภาพแวดล้อมและประชาชนในพื้นที่ให้น้อยที่สุด เนื่องจากโครงการมีลักษณะเป็นทางหลวงที่ตัดผ่านพื้นที่สำคัญ ดังนี้
- มีพื้นที่อนุรักษ์ทางด้านทรัพยากรธรรมชาติและสิ่งแวดล้อมที่สำคัญ อยู่ทั้งสองฝั่งของถนน 2 แห่ง คือ พื้นที่อุทยานแห่งชาติตาพระยา และพื้นที่เขตรักษาพันธุ์สัตว์ป่าดงใหญ่
- พื้นที่โครงการตั้งอยู่ใกล้พื้นที่แหล่งมรดกโลกที่ขึ้นบัญชีแหล่งมรดกโลกตามอนุสัญญาระหว่างประเทศ ที่ได้รับการประกาศให้เป็นแหล่งมรดกโลกทางธรรมชาติ (World Heritage) ผืนป่าดงพญาเย็น-เขาใหญ่ (อุทยานแห่งชาติเขาใหญ่ ปางสีดา ทับลาน ตาพระยา และเขตรักษาพันธุ์สัตว์ป่าดงใหญ่)
- พื้นที่โครงการตั้งอยู่ใกล้โบราณสถาน มีโบราณสถานและสถานที่สำคัญทางประวัติศาสตร์ ในระยะทาง 1 กิโลเมตร ซึ่งเป็นโบราณสถานที่ขึ้นทะเบียนให้เป็นโบราณสถานของชาติตามพระราชบัญญัติโบราณสถาน โบราณวัตถุ ศิลปวัตถุ และพิพิธภัณฑสถานแห่งชาติ พ.ศ. 2504